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HPLC测定人血浆中阿比朵尔的浓度及人体药动学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立阿比朵尔血药浓度测定方法,并用于研究阿比朵尔人体代谢过程。方法:采用高效液相色谱紫外检测法测定阿比朵尔的血药浓度,紫外检测波长315 nm。色谱柱:Alltech Apollo C_(18)(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相:0.1%三乙胺水溶液(加磷酸调 pH 至2.0)-乙腈(52.5:47.5)梯度洗脱;流速:1.0 mL·min~(-1)。用该方法测定24名健康志愿者单次口服0.6 g 血浆药物浓度,应用 DAS1.0计算其药动学参数。结果:血药浓度线性范围0.005~2.56 μg·mL~(-1),线性良好,r=0.9997,血浆最低检测浓度为0.005μg·mL~(-1),该方法的相对回收率为93.16%~101.2%,绝对回收率为88.61%~96.99%,日内、日间 RSD(n=5)分别为2.1%~2.9%和1.6%~3.9%。24名健康志愿者单次口服0.6g 的 AUC_(0-t)为8055.08 mg·h·mL~(-1),T_(max)为1.5h,C_(max)为0.869 μg·mL~(-1),T_(1/2)为10.59 h。结论:本法操作简便,灵敏度高,重现性好,可以满足本试验低浓度药物测定及药代动力学研究。 相似文献
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目的探讨转基因JAK2介导的脐血干祖细胞长期扩增调控的可行性和安全性。方法构建逆转录病毒载体MGI-F2JAK2,内含有JAK2基因的功能催化区和两个与小分子靶向基因合成药物(AP20187)结合的位点蛋白(2xF36v,F2)组成。AP20187可与F36v特异结合引起JAK2二聚化而激活细胞内信号传导。该载体同时含有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因,用作检测细胞增殖的标记。应用MiniMACS免疫磁珠分选系统纯化分离脐血CD34 细胞,用含JAK2的逆转录病毒上清转染脐血CD34 细胞。转导后的CD34 细胞在SCF、FL、TPO、IL-6细胞因子的联合培养条件下,以不加或加入AP20187分别作为对照组和实验组。定期检测CD34 细胞基因转移后GFP动态变化、细胞免疫标记、造血祖细胞集落培养和裸鼠致瘤试验。结果分选的CD34 细胞纯度为91%以上,基因转移率为49.3%±6.2%;实验组AP20187 SCF FL TPO IL-6(ASFTI)与对照组SCF FL TPO IL-6(SFTI)组均可获得CD34 细胞大量扩增。随着培养时间的延长,实验组扩增的CD34 细胞GFP阳性率由基线水平逐渐上升于第11周时达到95%以上,而对照组GFP阳性率逐渐下降到基线水平以下并逐渐消失。在培养6周左右,实验组CD34 CD38-、CD34 CD38 细胞亚群扩增倍数分别为(228.26±32.31)、(321.48±40.52),分别与对照组相比,差异有显著性。ASFTI组转基因CD34 细胞于12周后仍可产生造血祖细胞集落(BFU-E、CFU-GM、CFU-Mix)。扩增后CD34 细胞检测染色体核型正常,裸鼠实验无致瘤特性。结论转染JAK2基因的人脐血CD34 细胞协同其他细胞因子可以体外长期扩增脐血干祖细胞,对今后开展干细胞治疗某些遗传性血液病有潜在的应用价值。 相似文献
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电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)是20世纪80年代发展起来的分析测试技术,它以独特的接口将电感耦合等离子体的高温电离特性与四极杆质谱仪的灵敏快速扫描特性相结合,近年来已成为痕量、超痕量无机成分及同位素分析公认的可靠分析技术。该技术具有检出限低、动态线性范围宽、谱线简单、分析精密度高、分析速度快、可提供同位素信息以及可同时测定多种元素等特征,已广泛应用于地质、环境、生物、医学、冶金和化工等多种研究领域。 相似文献
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目的探讨激活JAK3信号传导通路是否能够体外长期扩增调控T淋巴祖细胞并评价其定向分化潜能的可行性。方法构建含有JAK3基因的逆转录病毒载体MG I-F2JAK3,内含有绿色荧光蛋白(GFP)和两个可以结合小分子二聚化合物AP20187的结合位点F36v。将该载体转入小鼠的骨髓造血干细胞中,在无血清培养基X-V ivo15培养体系中扩增,分为4组:空白对照组;AP20187组;干细胞因子(SCF)组;AP20187+SCF组。对扩增的细胞进行流式细胞仪检测免疫分型,定向分化、胸腺内注射等研究。结果AP20187+SCF组可以使转导的造血细胞获得长期大量对数级的扩增,扩增50 d后细胞可以达到1.2×1012倍±0.2×1012倍,所扩增的细胞为最早期的T淋巴祖细胞,表型为C-k ith iCD44+CD25-TN。该祖细胞群在SCF+IL-7+IL-3培养条件下,可定向分化为Thy1.2阳性的T淋巴细胞,并在小鼠的胸腺内可定向分化为GFP+CD3+和GFP+CD4+双阳性的成熟T淋巴细胞。结论AP20187联合SCF激活JAK3信号,可以大量扩增最早期的T淋巴祖细胞。该祖细胞具有定向分化为成熟T淋巴细胞的功能。该系统有助于研究T淋巴细胞的发生发育。 相似文献
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临床检验室间质量评价计划主要问题以及研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
室间质量评价(能力验证)作为实验室检测质量提高的一种重要手段,在实验室全面质量管理的过程中起到了非常重要的作用。目前的室间质量评价计划不论是在评价限的设置还是靶值的制定以及质控品的制备和选择方面都存在一些问题。本文回顾了室间质量评价计划的发展历程,详细阐述了室间质量评价计划目前存在且需亟待解决的问题,同时明确指出室间质量评价计划未来的发展方向。 相似文献
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在HCV感染宿主过程中,病毒首先结合到靶细胞表面,经受体介导进入细胞,然后才能复制、表达病毒蛋白并引起相关的病理变化。因此,HCV宿主细胞表面的受体或辅助受体的研究显得尤为重要。目前难以从感染的血清和组织中分离天然HCV病毒颗粒,此外缺乏有效的体外病毒复制系统和小动物模型,所以,HCV宿主细胞表面受体及HCV感染靶细胞机制仍不太清楚。 相似文献
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基因治疗的关键问题是找到安全有效的基因转运载体.目前,基因治疗中常用的病毒载体和非病毒载体均存在一定程度的缺点,从而限制了基因治疗的发展.病毒样颗粒(virus-like par-ticles,VLPs)是缺乏病毒基因组.而仅由一种或几种病毒衣壳蛋白自我组装而成的不具有复制能力的颗粒,所以其可弥补上述载体的不足而成为具有应用前景的新型基因转运载体.本文拟对用于基因治疗的VLPs构建方法及应用研究进展作一综述. 相似文献
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